一、选料与配料
选新鲜干净的锯末或棉籽壳为原料。若原料不新鲜，使用前应经烈日曝晒2-3天。大批量生产应一次备足原料，并放在防潮、通风良好的场地贮存。配料时先将65%锯末(如锯末过细应加入适量刨花)、30%米糠、5%菜园土混匀，再称出占干料总量1%的蔗糖、0.2% 的尿素、0.3% 的硝酸铵、0.5%的硫酸镁、2%的石膏粉、1%的过磷酸钙、0.1%的磷酸二氢钾，按总料量与水比例为1∶1.2至1∶1.3加水搅匀，再加入0.01%的高锰酸钾，充分搅拌，使其含水量达到60%左右(手捏成团指缝间有水印)，pH值调至5.5-6。如以棉籽壳为原料可按棉籽壳90%、园田土3%、麦麸5%，石膏粉1%，蔗糖1%的比例配料，总料量与水比例为1∶1.4，将各种成分分别加水调拌并混合均匀，pH值调至5.5-6，含水量要求以手握原料，指缝间略有水滴为度，切不可用水过量以防养分随水流失，影响菌丝正常生长。有条件者可适当掺加土豆汁、豆饼水等，均有不同程度的增产效果。
二、制袋与装袋
将聚丙烯塑料薄膜裁成长50-60厘米、宽26厘米，对折后用热合机加工成细长筒膜，再密封一头成塑料袋。要求袋边、袋口封合严密，以防细菌侵染。然后把拌好的原料装袋，边装边压实，直至装满，再用线绳扎好袋口，即呈圆柱状，并稍加压扁使其略有平面，以利培养及排放。
三、灭菌与接种
将装好的菌袋置灭菌锅内进行消毒灭菌，灭菌时间可根据锅内容积大小与装料多少而定， 一般常压蒸气灭菌100℃持续6-8小时，然后取出放在冷却室内，待料温降至20℃时接种。接种时选用菌丝洁白、健壮、生长旺盛、无杂菌污染的菌种，在无菌室或接种箱内，严格按照无菌操作规程进行接种，整套程序要求严密迅速，以防杂菌侵入。接种时先将原种(二级扩大种)瓶口打开，以酒精灯火焰封口，然后再将栽培袋口解开，用接种钩迅速取出原种接入栽培袋内， 每袋接种量25-50克，接完种后，在袋口塞一棉团，松紧适宜，扎好袋口，有利通气供氧，促进猴头菌丝健壮生长。
四、栽培与管理
接种后将栽培袋移进栽培室，排放于地面或角铁层架上，室温控制在25-30℃，经30-35天菌丝即可长满菌袋。低于12℃生长缓慢，高于33℃则需通风降温。当猴头菌蕾出现后，可将室温降至18-28℃，以20-23℃发育最好，现蕾最快。当菌蕾长至瘤状突起时，即可在其顶上塑料薄膜处撕1个小孔，或解开袋口，再将室温降至16-18℃，此时管理应注意通风换气(猴头菇是一种好气性真菌，只有在通气良好的情况下，才能促进菌丝体的生长和子实体的形成)，每日早、中、晚各打开门窗1次，每次通风15-20分钟。子实体生长阶段空气相对湿度以90%-95%为宜，低于90%，生长缓慢，肉质低劣，子实体瘦小;低于60%很难现蕾，即便出现幼蕾，也会很快干枯;高于95%以上，则易出现畸形蕾，多表现为松散分枝型，且易腐烂变质。猴头菇喜光，需有一定的散射光，在完全黑暗条件下，菌丝虽能生长，但很难形成子实体。因此在培养猴头菇时必须保持室内明亮，最好有散射光，避免阳光直射。一般在猴头子实体生长期间，要注重勤喷雾状水以利提高产量。
五、采收
当子实体球块长满菌刺，菌刺长的约1厘米、色泽白色即可采收。采收时以左手按袋，右手紧握子实体慢转而下，注意菌柄不宜留茬过高，以免喷水后腐烂招引杂菌及虫害。
